三種常見(jiàn)病原菌

綠膿桿菌（Pa）是革蘭氏陰性桿菌，廣泛存在于自然界中，常寄生于人和動(dòng)物的體表、呼吸道、消化道，免疫力下降是重要的發(fā)病誘因，在燒傷感染中綠膿桿菌檢出率較高。綠膿桿菌是SPF級(jí)小鼠必檢項(xiàng)目, 主要定植于腸道內(nèi)和糞便中。對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物而言，SPF 小鼠及無(wú)菌小鼠被綠膿桿菌感染后，多數(shù)不表現(xiàn)癥狀，當(dāng)宿主免疫系統(tǒng)受損，常可引起感染、炎癥、敗血癥甚至死亡等。但進(jìn)行醫(yī)藥、生物制品實(shí)驗(yàn)時(shí)，常影響試驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗，故綠膿桿菌已被列為無(wú)特定病原體小鼠必須排除的細(xì)菌之一。

產(chǎn)酸克雷伯菌(Ko)是克雷伯菌屬中的一個(gè)重要物種，形態(tài)呈直桿狀，大多數(shù)菌株具有多糖莢膜，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢。產(chǎn)酸克雷伯菌目前未被列為SPF級(jí)動(dòng)物必須排除的病原體。但是產(chǎn)酸克雷伯菌是實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)病原菌，被杰克遜（JAX）實(shí)驗(yàn)室明確列為“排除性病原體"，即其供應(yīng)的所有品系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（尤其是免疫缺陷品系）均要求無(wú)此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風(fēng)險(xiǎn)群體，研究發(fā)現(xiàn)，免疫缺陷小鼠中產(chǎn)酸克雷伯菌的檢出率達(dá)4.55%。

奇異變形桿菌（Pm）屬于變形桿菌屬，是一種重要的條件致病菌。菌體呈直桿狀，具有周身鞭毛，因此運(yùn)動(dòng)性非常活躍。顯著的特征之一是在固體培養(yǎng)基（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂）上的“遷徙生長(zhǎng)"或“群游"現(xiàn)象。

常見(jiàn)病原菌的檢測(cè)

這三種菌在清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中檢出率較高，檢測(cè)目前多采用培養(yǎng)法的檢測(cè)方法, 即通過(guò)分離培養(yǎng)、菌落形態(tài)特征和生化反應(yīng)特征來(lái)確定動(dòng)物體中是否感染病原菌。通過(guò)幾天的培養(yǎng)后觀察病原菌的形態(tài)、染色等生化反應(yīng)，判斷菌的種類，這種檢測(cè)方法對(duì)實(shí)驗(yàn)人員的經(jīng)驗(yàn)要求比較高，培養(yǎng)時(shí)間比較長(zhǎng)，需要一種快捷的檢測(cè)方案實(shí)現(xiàn)三種菌的檢測(cè)，并且檢測(cè)準(zhǔn)確度高，靈敏度高。

當(dāng)前檢測(cè)病原菌的一種有效的手段是qPCR的檢測(cè)方案。翼和生物開(kāi)發(fā)的Biowing®SPF級(jí)大小鼠常見(jiàn)病原菌qPCR檢測(cè)試劑盒，采用高靈敏度和特異性的探針?lè)╭PCR技術(shù)，專為在多種樣本類型中快速、高靈敏地篩查SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)室大小鼠常見(jiàn)的病原菌而設(shè)計(jì)，可快速檢測(cè)綠膿桿菌（Pa）、產(chǎn)酸克雷伯菌(Ko)、奇異變形桿菌（Pm）常見(jiàn)病原菌。一管中分別在FAM（銅綠假單胞菌Pa），HEX（產(chǎn)酸克雷伯菌Ko），ROX（奇異變形桿菌Pm）三個(gè)通道檢測(cè)3種病原菌。另外設(shè)計(jì)一套引物探針在CY5通道檢測(cè)內(nèi)參DNA。該試劑盒具有以下特點(diǎn)：靈敏：檢測(cè)靈敏度較高，10 CFU可被有效檢出。穩(wěn)定：全程閉管操作，無(wú)交叉污染。可靠：含內(nèi)參對(duì)照，避免假陰性。方便：操作簡(jiǎn)單，一步法檢測(cè)。