細(xì)胞/血清游離線粒體DNA拷貝數(shù)檢測

在衰老研究、腫瘤診療和慢性病管理的浪潮中，線粒體DNA（mtDNA）正成為炙手可熱的生物標(biāo)志物。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司深耕分子診斷領(lǐng)域多年，全新推出 MtDNAcn 50 檢測試劑盒，以“雙色熒光 qPCR + 絕對定量"核心技術(shù)，為細(xì)胞及血清游離 mtDNA 拷貝數(shù)檢測提供高效、穩(wěn)定、可重復(fù)的解決方案。

一、產(chǎn)品亮點  

1. 雙色熒光探針（FAM + HEX）  

   • 同步擴(kuò)增線粒體基因與核基因內(nèi)參，真正做到單孔雙檢，省時省樣。  

2. 絕對定量，結(jié)果更可信  

   • 配套已知拷貝數(shù)標(biāo)準(zhǔn)品 A 與校正品 B，構(gòu)建雙標(biāo)準(zhǔn)曲線，校正批次差異，輕松實現(xiàn)絕對定量。  

3. 廣泛樣本適配  

   • 適用于細(xì)胞 gDNA、血清/血漿游離 DNA，滿足衰老、代謝、腫瘤等多領(lǐng)域研究需求。  

4. GMP 級生產(chǎn)，批批質(zhì)控  

   • 嚴(yán)格按 GMP 規(guī)范生產(chǎn)，每批試劑盒均通過功能性質(zhì)檢，確保批次間穩(wěn)定性。

二、性能數(shù)據(jù)  

• 擴(kuò)增效率：95–105%  

• 重復(fù)性：CV < 3%  

• 線性范圍：10^1–10^6 拷貝  

• 適用平臺：ABI 7500、QuantStudio 系列、Roche LightCycler 等主流 qPCR 儀

三、操作流程——三步上手  

1. 樣本制備：EDTA 抗凝全血 30 min 內(nèi)分離血清，DNA 提取試劑盒即提即用。  

2. qPCR 體系：18 μL 預(yù)混液 + 2 μL 模板（10 ng/μL），石蠟油封閉，防蒸發(fā)。  

3. 程序運行：95 ℃ 2 min →（95 ℃ 15 s → 56 ℃ 1 min → 72 ℃ 30 s）× 40，72 ℃ 采集熒光。

四、數(shù)據(jù)分析——輕松獲得絕對拷貝數(shù)  

• 標(biāo)準(zhǔn)品 3 點梯度自動生成線粒體與內(nèi)參雙標(biāo)準(zhǔn)曲線。  

• 校正品計算批次校正系數(shù) K2，一鍵修正，結(jié)果更精準(zhǔn)。  

• 樣本 Ct 值代入方程，即可得到細(xì)胞或每毫升血清中的 mtDNA 拷貝數(shù)。

五、應(yīng)用場景  

• 衰老與長壽研究：評估線粒體功能衰退趨勢。  

• 腫瘤液體活檢：檢測循環(huán)游離 mtDNA，輔助早期診斷與療效監(jiān)測。  

• 代謝性疾病：探索糖尿病、心血管病等與 mtDNA 拷貝數(shù)變異的關(guān)聯(lián)。  

• 藥物毒理：監(jiān)測藥物對 mtDNA 的影響，優(yōu)化安全性評價。