CHO殘留DNA的相關規定及要求

在預防及治療性蛋白制品的生產中，即使經歷嚴格的純化和質控，最終產品仍然會受到來自動物、細菌和酵母等宿主細胞的殘留DNA（Residual host cellular DNA）污染，這些殘留DNA以碎片化形式存在并可能產生潛在的致癌性、免疫原性和感染性等風險。為了保證生物制品的安全性，建立精準可控的宿主細胞殘留DNA檢測方法十分重要。

世界衛生組織（WHO）、美國食品藥品監督管理局（FDA）、歐盟（EU）均對每劑量生物制品宿主殘留DNA含量做出了規定，根據材料來源和生產工藝，一般允許生物制劑存在100 pg/劑量以下的宿主細胞殘留DNA，最高允許達到10 ng/劑量，《中華人民共和國藥典（2020年版）》第三部規定以動物細胞生產的生物制劑中殘留DNA不超過100 pg/劑量，以細菌真菌生產的生物制劑中殘留DNA不超過10 ng/劑量。殘留DNA的片段化程度是生物制劑安全性的另一重要指標，一定長度的殘留DNA存在整合致癌風險，世界各國藥物監管機構都要求盡可能降低殘留DNA的片段長度，如WHO和FDA要求宿主細胞殘留DNA長度不超過200 bp。

中美兩國藥典均規定，DNA探針雜交法、熒光染色法和定量PCR法作為檢測宿主細胞殘留DNA的典型方法，其中相比于探針雜交和熒光染色法，定量PCR法以其靈敏度、準確性、省時等特征，得到了最為廣泛的應用，并由此開發了一系列針對特定宿主細胞的前處理及檢測試劑盒。