生命長短的標(biāo)記-端粒

端粒由高度重復(fù)的 DNA 序列（如人類的（TTAGGG）n）與特定蛋白復(fù)合體構(gòu)成，它為染色體末端提供了穩(wěn)固的保護屏障，避免其在細胞分裂過程中受到侵蝕與降解。

研究表明，端粒長度與衰老、癌癥、神經(jīng)退行性疾病等多種疾病存在著千絲萬縷的聯(lián)系。從胎兒到老年人，人體細胞的端粒長度隨著年齡增長而呈現(xiàn)縮短趨勢，它就像一個伴隨著生命歷程的隱形時鐘，記錄著細胞的繁衍與衰老軌跡，全血端粒長度甚至可作為其他人體組織端粒長度的替代指標(biāo)，為評估個體健康狀況和疾病風(fēng)險提供了重要依據(jù)。

端粒長度檢測的方法有哪些

TRF法檢測端粒長度 ：科研和臨床金標(biāo)準(zhǔn)

TRF分析也稱作端粒的Southern印跡法，是應(yīng)用針對端粒重復(fù)序列的探針來檢測限制性酶切后所保留的端粒的方法。

限制性酶會將基因組DNA消化為短的片段， 留下大量完好的端粒，即所謂的端粒限制性片段。

以凝膠電泳分離基因組片段 ，通過放射性探針 (CCCTAA)。

QPCR法檢測端粒長度：操作簡便，用時短，適用于批量檢測

端粒為染色體末端GGGATT 6堿基重復(fù)序列 ，設(shè)計PCR引物十分困難（二聚體不可避免），也無法設(shè)計Taqman探針。

2002年， Richard通過引物中引入突變 ，減少二聚體的產(chǎn)生，成功利用SYBR Green染料法測定端粒的相對長度。

翼和總體設(shè)計方案：雙重?zé)晒?/span>QPCR

? 利用SYBR green 染料檢測端粒擴增產(chǎn)物

? 利用VIC熒光標(biāo)記的Uniprimer（發(fā)夾型）引物，檢測內(nèi)參基因擴增產(chǎn)物

優(yōu)點：擴增效率高，體系穩(wěn)定性強，消除孔間差異，減小誤差。

端粒擴增產(chǎn)物量遠高于內(nèi)參基因的擴增產(chǎn)物，因此內(nèi)參基因擴增產(chǎn)物中SYBR green 參入產(chǎn)生的熒光可忽略。