線粒體作為細(xì)胞的“能量工廠"，其功能高度依賴線粒體DNA（mtDNA）的完整性。mtDNA拷貝數(shù)（每個(gè)細(xì)胞中mtDNA的分子數(shù)）不僅是評(píng)估線粒體功能的金標(biāo)準(zhǔn)，更與衰老、代謝紊亂、神經(jīng)退行性疾病及癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。隨著精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的興起，mtDNA拷貝數(shù)檢測(cè)技術(shù)已成為疾病診斷、機(jī)制研究和藥物開發(fā)的核心工具。

檢測(cè)原理

試劑盒巧妙運(yùn)用雙色熒光 TaqMan 探針法定量 PCR 技術(shù)。

細(xì)胞內(nèi)線粒體檢測(cè)時(shí)，FAM 熒光精準(zhǔn)追蹤線粒體拷貝數(shù)，HEX熒光同步記錄細(xì)胞數(shù)目，二者協(xié)同，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線，勾勒出線粒體在細(xì)胞內(nèi)的真實(shí)分布圖。

而游離線粒體檢測(cè)，FAM 熒光專注計(jì)算線粒體拷貝數(shù)，HEX熒光則化身質(zhì)檢員，對(duì)游離基因組 DNA 抽提質(zhì)量嚴(yán)格把關(guān)，確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）的檢測(cè)方案，通過(guò)以下創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)了技術(shù)躍升：  

1) 特異性探針設(shè)計(jì)：針對(duì)mtDNA保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物與探針，避免核基因組DNA干擾，特異性高達(dá)99.9%。  

2) 雙標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)：引入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和校正品，構(gòu)建動(dòng)態(tài)范圍覆蓋1~10^6拷貝的定量曲線，檢測(cè)下限低至1拷貝/μL。  

3) 自動(dòng)化數(shù)據(jù)分析：結(jié)合AI算法優(yōu)化閾值循環(huán)（Ct值）判定，減少人為誤差，提升重復(fù)性（CV值<5%）。  

實(shí)力見證：科研與臨床的雙重認(rèn)可

在細(xì)胞內(nèi)線粒體拷貝數(shù)檢測(cè)的科研戰(zhàn)場(chǎng)上，清晰描繪出線粒體拷貝數(shù)隨年齡增長(zhǎng)的變化軌跡，為衰老機(jī)制研究提供關(guān)鍵證據(jù)。

而在游離線粒體領(lǐng)域，通過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?/span> spearman 相關(guān)系數(shù)分析，試劑盒精準(zhǔn)揭示出游離線粒體與年齡、性別的微妙關(guān)系，為相關(guān)研究提供了重要參考，助力科研人員深入探究線粒體在不同生理狀態(tài)下的奧秘。