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主營產(chǎn)品:主要技術(shù)服務(wù):細(xì)胞STR鑒定;支原體檢測(cè);細(xì)胞種屬檢測(cè);端粒長度檢測(cè);端粒酶活性檢測(cè)等。
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    肺炎克雷伯菌對(duì)實(shí)驗(yàn)用鼠的危害與檢測(cè)

    發(fā)布時(shí)間: 2025-06-25  點(diǎn)擊次數(shù): 241次

    肺炎克雷伯菌革蘭氏陰性桿菌,常成對(duì)或短鏈狀排列具有肥厚莢膜通常無鞭毛,無動(dòng)力但有菌毛目前已發(fā)現(xiàn)超過80種不同的K抗原血清型O抗原血清型。毒力因子包括:莢膜多糖脂多糖菌毛外膜蛋白毒素(部分高毒力株可能產(chǎn)生如腸毒素、細(xì)胞毒素)

    肺炎克雷伯菌具有多重耐藥、廣泛耐藥甚至接近全耐藥

    主要耐藥機(jī)制:生成β-內(nèi)酰胺酶AmpC氨基糖苷類修飾酶等酶抑制抗生素通過氟喹諾酮類靶位改變和外排泵脂多糖修飾等方式耐受抗生素

    耐藥基因傳播:耐藥基因常位于質(zhì)粒、轉(zhuǎn)座子、整合子等可移動(dòng)遺傳元件上,極易在同種或不同種細(xì)菌間水平傳播。

    肺炎克雷伯菌可通過腹腔、呼吸道等途徑感染小鼠,導(dǎo)致敗血癥和多器官衰竭。與其他應(yīng)激源產(chǎn)生協(xié)同危害,對(duì)實(shí)驗(yàn)研究造成干擾:炎癥指標(biāo)異常、體質(zhì)量下降與行為異常、病理改變混淆實(shí)驗(yàn)結(jié)果,毒理學(xué)、免疫學(xué)等科研實(shí)驗(yàn)無法正常進(jìn)行

    根據(jù)中國國標(biāo)GB14922-2022《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》肺炎克雷伯菌是SPF級(jí)大小鼠必須排除的病原體。

     

    檢測(cè)國家標(biāo)準(zhǔn):GB/T 14926.13-2001

     

    該標(biāo)準(zhǔn)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺炎克雷伯菌檢測(cè)的基礎(chǔ)規(guī)范,適用于小鼠、大鼠的檢測(cè)。

     

    檢測(cè)原理

     

    基于細(xì)菌的培養(yǎng)特性、形態(tài)學(xué)和生化反應(yīng)。

     

    檢測(cè)流程

     

    操作步驟:樣本接種DHL瓊脂→36℃培養(yǎng)18-24小時(shí)→挑取可疑菌落(粘液狀)生化鑒定

    分離培養(yǎng):使用 DHL瓊脂作為選擇性培養(yǎng)基,肺炎克雷伯菌形成淡粉色光滑濕潤的粘液狀菌落接種針可拉出較長的絲

    生化鑒定二乙酰+酸鹽還原+、甲基紅-枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)+丙二酸鹽+尿素酶試驗(yàn)+賴氨酸脫羧酶+、鳥氨酸脫羧酶-、靛基質(zhì)-、半固體動(dòng)力-。(+表示陽性,-表示陽性)

     

    分子生物學(xué)檢測(cè)(qPCR

     

    除國標(biāo)外,分子生物學(xué)檢測(cè)(qPCR提升了檢測(cè)效率和準(zhǔn)確性:實(shí)驗(yàn)時(shí)間6小時(shí)靈敏度高,操作步驟簡單,適用于大規(guī)模篩查,如中南大學(xué)病原體檢測(cè)項(xiàng)目將其納入招標(biāo)范圍今年新招標(biāo)文件(如中南大學(xué)2025年項(xiàng)目)顯示,分子檢測(cè)方法已逐步納入國標(biāo)補(bǔ)充體系被科研院校接受使用

    目前在用的翼和病原菌檢測(cè)試劑盒能夠很好的檢測(cè)肺炎克雷伯菌在內(nèi)的多種病原微生物,符合實(shí)驗(yàn)室的要求,使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能夠匹配到目標(biāo)病原微生物的DNA

     

     


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