小鼠肝炎病毒(MHV)特點(diǎn)及其檢測(cè)方法

感染小鼠肝炎病毒臨床特點(diǎn)

小鼠肝炎疾病是由小鼠肝炎病毒(MHV)感染引起的小鼠常見(jiàn)疾病，MHV的分布范圍廣，傳染性強(qiáng)。MHV感染臨床表現(xiàn)為肝炎、腦炎和腸炎，癥狀與感染的毒株相關(guān)。MHV的自然感染途徑為口及呼吸道，也可通過(guò)垂直傳播。群體內(nèi)的傳染源是感染小鼠的糞便和墊料。一般情況下，大部分帶毒小鼠為隱性感染，無(wú)明顯外觀改變，但是在某些環(huán)境的刺激下會(huì)暴發(fā)疾病。在低溫條件下仍可存活，當(dāng)免疫抑制、應(yīng)激或其他因素導(dǎo)致帶毒小鼠免疫力下降時(shí)，潛伏感染可被激活，引發(fā)臨床癥狀甚至死亡，并可能在群體內(nèi)爆發(fā)流行。MHV是嚙齒類(lèi)動(dòng)物中難以消滅的病毒之一，因?yàn)槠潆[性感染和感染后的嚴(yán)重程度，實(shí)驗(yàn)小鼠的MHV感染應(yīng)引起廣大研究學(xué)者的高度重視，而對(duì)MHV的防治措施更應(yīng)該是重中之重。

當(dāng)小鼠感染小鼠肝炎病毒，則可能會(huì)出現(xiàn)致死性的病毒性腦炎、肝炎以及腸炎。如果在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中使用感染了小鼠肝炎病毒的小鼠，或者在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中感染了病毒，不僅會(huì)造成大規(guī)模傳播，還會(huì)對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程產(chǎn)生影響，并對(duì)同一環(huán)境中的活生物體構(gòu)成一定威脅。

小鼠肝炎病毒MHV的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

小鼠肝炎病毒(MHV)屬于冠狀病毒，呈圓形或者多形態(tài)，表面帶有囊膜與花瓣?duì)罾w突。MHV病毒是單股正鏈RNA，且為線性不分段。它的病毒粒子呈多形態(tài)或圓形，它的直徑一般為80~160nm。MHV的囊膜蛋白主要由3個(gè)蛋白結(jié)構(gòu)組成:M蛋白、S蛋白和E蛋白。M蛋白是其中比較保守的抗原決定蛋白；而S蛋白主要功能是介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞，可以識(shí)別細(xì)胞表面的MHV病毒受體，進(jìn)而參與MHV感染的過(guò)程；E蛋白則是在病毒組裝和脫殼過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用蛋白。而核衣殼蛋白(N)又與RNA結(jié)合之后構(gòu)成了位干病毒中心的核蛋白殼，其結(jié)構(gòu)呈螺旋狀。最后病毒囊膜包繞在其上，從而形成病毒粒子。

小鼠肝炎病毒分類(lèi)

MHV呈根據(jù)MHV特性的不同，可將MHV分為兩類(lèi):呼吸毒株和腸毒株。呼吸毒株有MHV-1、MHV2、MHV-3、MHV-JHM、MHV-A59等;腸毒株有MHV-Y、MHV-S、MHV-U等。多數(shù)的研究結(jié)果都是通過(guò)呼吸毒株的MHV得到的,尤其關(guān)于MHV-JHM、MHV-A59株的研究較多。感染MHV后小鼠會(huì)有腸炎和肝炎的臨床表現(xiàn)。傳染源頭一般是帶毒小鼠的糞便和墊料，MHV可通過(guò)胎盤(pán)垂直傳播，這導(dǎo)致不帶母源抗體的乳鼠感染易發(fā)病和死亡。

小鼠肝炎病毒檢測(cè)方法

常規(guī)樣本的MHV檢測(cè)方法，多采取血清學(xué)方法。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠肝炎病毒檢測(cè)方法》(GB/T14926.22-2001）中指出的檢測(cè)方法有酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)、間接免疫熒光抗體實(shí)驗(yàn)(IFA)和免疫酶實(shí)驗(yàn)(IEA)。除此之外，RT-PCR是用于檢測(cè)MHV感染的常用的方法。

這些方法中的酶聯(lián)免疫吸附法應(yīng)用已經(jīng)非常成熟，通常使用能檢測(cè)多種MHV毒株抗體的混合抗原，“高通量，適合大批量樣本篩查，靈敏度高；然而，它的缺點(diǎn)是無(wú)法區(qū)分當(dāng)前感染還是既往感染，也不能用作診斷免疫缺陷小鼠和早期病毒感染（未產(chǎn)生抗體，導(dǎo)致漏檢）的方法。相反，它更常用于病毒感染后期的回顧性診斷。通常遇到ELISA檢測(cè)陽(yáng)性的樣本可用IFA的方法再進(jìn)行檢測(cè)，兩種檢測(cè)方法都是陽(yáng)性的時(shí)候可確認(rèn)為陽(yáng)性，有時(shí)也作為獨(dú)立方法使用。

RT-PCR檢測(cè)病毒時(shí)所需的樣本量少、更是可以在疾病早期檢測(cè)到病毒感染，特異性高，可進(jìn)行毒株分型（設(shè)計(jì)特異性引物），所以RT-PCR檢測(cè)MHV也得到了廣泛的重視。此檢測(cè)方法的研究將對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中MHV的快速篩查，提高檢測(cè)效率和陽(yáng)性檢出率奠定良好基礎(chǔ)。缺點(diǎn)是僅代表采樣時(shí)存在病毒核酸（可能是活動(dòng)性感染，也可能是殘留核酸）；需要特定的實(shí)驗(yàn)室條件和防污染措施；成本通常高于血清學(xué)篩查。