小鼠肝炎病毒(MHV)特點及其檢測方法

感染小鼠肝炎病毒臨床特點

小鼠肝炎疾病是由小鼠肝炎病毒(MHV)感染引起的小鼠常見疾病，MHV的分布范圍廣，傳染性強。MHV感染臨床表現(xiàn)為肝炎、腦炎和腸炎，癥狀與感染的毒株相關。MHV的自然感染途徑為口及呼吸道，也可通過垂直傳播。群體內(nèi)的傳染源是感染小鼠的糞便和墊料。一般情況下，大部分帶毒小鼠為隱性感染，無明顯外觀改變，但是在某些環(huán)境的刺激下會暴發(fā)疾病。在低溫條件下仍可存活，當免疫抑制、應激或其他因素導致帶毒小鼠免疫力下降時，潛伏感染可被激活，引發(fā)臨床癥狀甚至死亡，并可能在群體內(nèi)爆發(fā)流行。MHV是嚙齒類動物中難以消滅的病毒之一，因為其隱性感染和感染后的嚴重程度，實驗小鼠的MHV感染應引起廣大研究學者的高度重視，而對MHV的防治措施更應該是重中之重。

當小鼠感染小鼠肝炎病毒，則可能會出現(xiàn)致死性的病毒性腦炎、肝炎以及腸炎。如果在動物實驗中使用感染了小鼠肝炎病毒的小鼠，或者在實驗過程中感染了病毒，不僅會造成大規(guī)模傳播，還會對動物實驗的整個過程產(chǎn)生影響，并對同一環(huán)境中的活生物體構(gòu)成一定威脅。

小鼠肝炎病毒MHV的結(jié)構(gòu)特點

小鼠肝炎病毒(MHV)屬于冠狀病毒，呈圓形或者多形態(tài)，表面帶有囊膜與花瓣狀纖突。MHV病毒是單股正鏈RNA，且為線性不分段。它的病毒粒子呈多形態(tài)或圓形，它的直徑一般為80~160nm。MHV的囊膜蛋白主要由3個蛋白結(jié)構(gòu)組成:M蛋白、S蛋白和E蛋白。M蛋白是其中比較保守的抗原決定蛋白；而S蛋白主要功能是介導病毒進入宿主細胞，可以識別細胞表面的MHV病毒受體，進而參與MHV感染的過程；E蛋白則是在病毒組裝和脫殼過程中發(fā)揮關鍵性作用蛋白。而核衣殼蛋白(N)又與RNA結(jié)合之后構(gòu)成了位干病毒中心的核蛋白殼，其結(jié)構(gòu)呈螺旋狀。最后病毒囊膜包繞在其上，從而形成病毒粒子。

小鼠肝炎病毒分類

MHV呈根據(jù)MHV特性的不同，可將MHV分為兩類:呼吸毒株和腸毒株。呼吸毒株有MHV-1、MHV2、MHV-3、MHV-JHM、MHV-A59等;腸毒株有MHV-Y、MHV-S、MHV-U等。多數(shù)的研究結(jié)果都是通過呼吸毒株的MHV得到的,尤其關于MHV-JHM、MHV-A59株的研究較多。感染MHV后小鼠會有腸炎和肝炎的臨床表現(xiàn)。傳染源頭一般是帶毒小鼠的糞便和墊料，MHV可通過胎盤垂直傳播，這導致不帶母源抗體的乳鼠感染易發(fā)病和死亡。

小鼠肝炎病毒檢測方法

常規(guī)樣本的MHV檢測方法，多采取血清學方法。國家標準《實驗動物小鼠肝炎病毒檢測方法》(GB/T14926.22-2001）中指出的檢測方法有酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、間接免疫熒光抗體實驗(IFA)和免疫酶實驗(IEA)。除此之外，RT-PCR是用于檢測MHV感染的常用的方法。

這些方法中的酶聯(lián)免疫吸附法應用已經(jīng)非常成熟，通常使用能檢測多種MHV毒株抗體的混合抗原，“高通量，適合大批量樣本篩查，靈敏度高；然而，它的缺點是無法區(qū)分當前感染還是既往感染，也不能用作診斷免疫缺陷小鼠和早期病毒感染（未產(chǎn)生抗體，導致漏檢）的方法。相反，它更常用于病毒感染后期的回顧性診斷。通常遇到ELISA檢測陽性的樣本可用IFA的方法再進行檢測，兩種檢測方法都是陽性的時候可確認為陽性，有時也作為獨立方法使用。

RT-PCR檢測病毒時所需的樣本量少、更是可以在疾病早期檢測到病毒感染，特異性高，可進行毒株分型（設計特異性引物），所以RT-PCR檢測MHV也得到了廣泛的重視。此檢測方法的研究將對實驗動物中MHV的快速篩查，提高檢測效率和陽性檢出率奠定良好基礎。缺點是僅代表采樣時存在病毒核酸（可能是活動性感染，也可能是殘留核酸）；需要特定的實驗室條件和防污染措施；成本通常高于血清學篩查。